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評價ELISA試劑盒的方法
更新時間:2013-12-18   點擊次數(shù):1067次

    ELISA試劑盒具有許多優(yōu)良特性。盡管有些處理需要*化條件,但只要按要求去做,就十分簡單明了,并容易掌握。尤其是該方法不需要花費大量的時間作野外觀察,ELISA試劑盒供試所采集的材料可收集起來并存一段時間,特別適用于一些只取食汁液而不取食獵物硬殼的捕食者胃內含物分析,因為獵物的堅硬部分沒有留在捕食者消化道或排泄物內。同時,高靈敏度、特異性、可重復性以及每次可處理大量材料使得該檢測法或得了滿意的效果。這是一般的血清學方法不能比擬的。該方法的一個缺點是在陰性反應中總有一定的顏色產(chǎn)生,必須要有一個標準來確定陽性反應的臨界點。

    目前,除繼續(xù)推廣ELISA試劑盒在捕食作用研究中的應用及發(fā)展更為有效的方法外,還有兩個問題需進一步研究。一是環(huán)境因子,ELISA試劑盒尤其是溫度對獵物在捕食者胃內殘存時間的影響,目前的研究還無法考慮不同溫度下消化速率的差異。二是需要對實驗室或得的數(shù)據(jù)與田間的進行比較分析,并對陽性反應率進行校正。這些問題的研究將有助于定量評價捕食作用。

     捕食作用的定量評價

   捕食作用的定量評價是昆蟲生態(tài)學家所希望解決的課題之一,但對生活在自然界的捕食者來說,其捕食作用受到各種環(huán)境因子的影響,它每次的捕食量和捕食后的消化速率是未知的。因此,要對捕食作用進行定量分析就存在很大困難。然而,如果消化的時間和每次取食的量通過實驗研究確定的話,則對捕食數(shù)量進行估計是可能的。尤其是ELISA的應用,為實現(xiàn)這種可能提供了保證。SOpp等對已有的工作進行了總結,并提出了一種改進的定量評價。張文慶等也提出了功能反應-血清法來定量評價捕食作用。迄今為止,定量評價的公式5能較好地擬合實驗結果。而公式2的擬合效果zui差。但根據(jù)公式要得到準確的定量評價結果仍是困難的。
 

ELISA試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

ELISA試劑盒結果判斷與分析:
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的8-OHdG標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的8-OHdG含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-80nmol/L。
4、敏感度: 0.1 nmol/L。

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